小鼠单克隆抗体制备

小鼠单克隆抗体简介：

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· Magic^TM hybridoma growth factor提高细胞融合成功率存活率，使抗体稳定表达

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服务具体内容：

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（suoshejizhuanluhouxiushiyibanbaokuo：linsuanhua、jiajihua、yixianhua、fansuhuaxiushideng）

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步骤	服务内容	周期
1. 动物免疫	1. 免疫5只小鼠，进行2-3次免疫； 2. 采集5只小鼠血清，分别做ELISA检测； 3. 提供鉴定报告。	4-6周
2.杂交瘤制备	效价合格后，经客户同意后，进行融合实验： 1. 选取血清效价高的小鼠的取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。 2．有限稀释融合细胞，96孔板克隆化； 3. HAT筛选杂交瘤细胞; 4. 免疫原检测，检测出抗原阳性1-10个阳性细胞，扩大培养至48孔板； 5. 挑取阳性克隆扩增，微量-80度冻存细胞【冻存细胞可保存1年以上】； 6. 提供客户1ml上清/阳性克隆，供客户检测，检测结果20天内反馈。客户根据自己的ELISA检测、功能检测结果，挑选阳性克隆；丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆，需要提前沟通，另行约定费用和保存方式。	4-6周
3.亚克隆	根据客户的要求，选取阳性克隆进行亚克隆： 1. 每个克隆做96孔板有限稀释培养，ELISA筛选阳性亚克隆； 2. 阳性克隆扩增，少量-80度冻存细胞； 3. 提供1ml杂交瘤细胞上清，供客户进行检测；检测结果请在20天内反馈。套餐中包括总共不超过3个阳性亚克隆细胞，默认根据结果好的3个阳性亚克隆，放大至T-25 Flask培养，ELISA再次确认后进行细胞冻存，每个亚克隆冻存3管细胞。	1-3周
4. 腹水制备(可选)	1. 客户选取的杂交瘤细胞制备腹水，免疫2只小鼠，Protein A纯化腹水，ELISA检测效价； 2. 提供纯化后杂交瘤细胞，<5mg/clone； 3. 提供实验报告和剩余腹水抗体；注：亦可选择细胞上清纯化。	1-3周
5. 套餐外阳性杂交瘤细胞的选取(可选)	套餐(3个亚克隆)之外的其它备选细胞, 若客户需要亚克隆,每额外增加一个亚克隆, 需要额外支付的费用。	N/A
6.抗体配对（可选）	1.若干株阳性单抗两两组合，进行夹心ELISA实验； 2.根据夹心ELISA实验结果挑选配对抗体； 3.出具相关的检测报告提供给客户。	2-4周
7.功能验证（可选）	可以根据客户对抗体的要求进行ELISA、WB等实验的检验验证，确定制备获得的抗体是否可用于该实验。	1-3周
8.保证型服务（可选）	重复前述实验（杂交瘤制备，抗体纯化和检测实验。如有必要则重复动物免疫实验）直至获得符合要求的抗血清或纯化抗体。	N/A