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分析流程
feibaxiangdaixiezuxuedeyibanfenxiliuchengwei
daixiepufenxi(yechengweichayibiaodafenxi):zaiyizushiyanheduizhaoyangpinzhong,xunzhaofengdugaibianyoutongjixueyiyideganxingqudaixiewu;
jianding:jinxingdaixiepufenxihou,cedingzheixiedaixiewudehuaxuejiegou;
jieshi:yanjiuliuchengdezuihouyibu,jieshisuofaxiandedaixiewuyushengwuguochenghuoshengwuzhuangtaizhijiandeguanlian。
技术路线
数据平台
1. NMR(核磁共振)
优点是对样品无破坏性,测定无偏向性,既适用于血液、尿液体液等液体样品,也适用于组织和器官等固体样品,并且测定速度快,可实现样品代谢组的动态监测,缺点主要是分辨率较低。
2. GC-MS(气相色谱)
GC-MS是代谢组学研究的技术,具有技术成熟稳定、分辨率高等特点,同时,由于具有相对完善的数据库,使得定性也好一些,缺点则主要表现在样品处理复杂,并且对于不易衍生化的物质定性和定量较困难,影响了该技术在更大范围内的使用。
3. LC-MS(液相色谱)
优点主要表现在样品制备和前处理简单、实验重复性好,分辨率高,分离和分析范围大,缺点则主要表现在数据库完善程度不够,定性相对困难。
样品要求
血清:
1、样品量要求:
NMR: 500µl/例 (不得低于200µl/例);GC-MS or LC-MS: 200µl/例;
避免反复冻融。
2、收集步骤:血液收集在离心管中静置30分钟进行凝固。然后3000rpm离心5分钟,取上清装载干净的离心管中,再离心5分钟,8000rpm,取上清分装到冻存管中,每管0.2 or 0.5ml,立即-80度冻存,直到干冰寄送。
3、注意事项:
(1)取血时如用酒精消毒,请擦干擦拭部位,待酒精完全挥发后再取样。
(2)取血时如用麻醉剂,建议用异氟醚 ,防止在NMR血清谱图中出现干扰峰。
(3)如要采用血浆,请使用肝素钠抗凝管。
尿液:
1、样品量要求:1ml/例,原则上可以多取一点。
2、收集步骤:尿液直接分装到离心管中,每管1ml,添加一滴(约10µl)质量体积为1/100(w/v)的叠氮化钠,-80度冻存寄送。
瘤胃液:
1、样品量要求:1ml/例,原则上可以多取一点。
2、收集步骤:瘤胃液经 6000×g 离心15min,取上清,分装, -80℃冷冻保存,干冰寄送。
为了让样品能保存更长的时间,取样之后可添加一滴(约10µl)质量体积为1/100(w/v)的叠氮化钠溶液。
其他种类的样品在收集之前请联系公司销售工程师。